滋養層和飼養層細胞的關系
飼養層細胞就是指一些特定細胞經有絲分裂阻斷劑處理后所得的細胞單層。那么滋養層和飼養層細胞的關系是什么?下面是學習啦小編精心為你整理的滋養層和飼養層細胞的關系,一起來看看。
滋養層和飼養層細胞的關系
1.滋養層細胞:
在胚胎發育成桑椹胚后,桑椹胚進一步發育,細胞開始出現分化。聚集在胚胎的一端,個體較大的細胞,稱為內細胞團(inner cell mass,ICM),將來發育成胎兒的各種組織,而沿透明帶內壁擴展和排列的,個體較小的細胞,稱為滋養層細胞,它們將來發育成胎膜和胎盤。
所以做基因診斷時,通常取少量滋養層細胞診斷是否患有遺傳病,這樣不會影響胎兒發育.
2.飼養層細胞:
在正常機體內,細胞除了獲得一些血液來的營養外,還在細胞與細胞之間互換特殊的物質,用于分裂分化和營養等。因而,在細胞體外培養中,除了正常的培養基外,先培養一層特殊的細胞,然后再在其上接種要實驗的細胞,這樣更能模擬體內環境。這些特殊的細胞就是飼養層細胞,通常是成纖維類細胞、輸軟管表皮細胞。
這些細胞可以提供實驗細胞更好的營養,有的分化研究則是必須有飼養層細胞。
滋養層和飼養層細胞的影響因素
飼養層的影響,主要體現在飼養層種類、絲裂霉素處理滋養層的時間、飼養層細胞的代數和飼養層細胞的密度等。動物種類不同對飼養層種類的要求也不同。
飼養層種類
STO PMEF: 對各種動物都較適宜,,但最可靠的方法還是根據動物種類篩選最佳飼養層為宜。有研究表明,PMEF比STO更適合用于小鼠ES(胚胎干細胞)的培養。
UE(子宮上皮細胞)
BRL(大鼠肝細胞)等
動物種類
需要經過篩選來確定最適宜該種動物ES分離克隆的飼養層
絲裂霉素處理滋養層的時間
目前絲裂霉素(常用有絲分裂阻斷劑)處理時間在小鼠成纖維細胞上一般要求為:在37攝氏度,5%二氧化碳飽和溫度的條件下處理24h,時間過短達不到預定目的,成纖維細胞不能被成功地抑制住,時間過長則使細胞老化,活性下降,分泌因子的能力降低,從而直接影響ES細胞增殖和分化的抑制。同時處理完的清洗工作也很重要,一般要求用無鈣鎂PBS沖洗4~5遍,以確保絲裂霉素的徹底清除。
飼養層細胞的代數及密度
以小鼠成纖維細胞為例,選3~5代,密度為10^6-10^7個/ml為宜,代數過低所含雜細胞太多,代數過高則細胞活力降低。
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